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蓝白斑筛选(蓝白斑筛选的原理)

蓝白斑筛选(蓝白斑筛选的原理)摘要: 今天给各位分享蓝白斑筛选的知识,其中也会对蓝白斑筛选的原理进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!本文目录一览:1、蓝白斑筛选挑蓝斑还是白斑...

今天给各位分享蓝白斑筛选的知识,其也会对蓝白斑筛选的原理进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!

蓝白斑筛选(蓝白斑筛选的原理)
(图片来源网络,侵删)

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蓝白斑筛选挑蓝斑还是白斑

1、这属于蓝白斑筛选 挑白斑 野生型大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。

2、这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。

3、你用的是蓝白斑筛选,白斑为插入目的基因片段的转化子,蓝斑则没有,挑取白色单菌落摇菌进行pcr检测验证。百度蓝白斑筛选。

4、如果是做基因克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑筛选。

蓝白斑筛选(蓝白斑筛选的原理)
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蓝白斑筛选

1、是重组子筛选的一种方法,一些载体带有β-半乳糖苷酶N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点,可用于构建重组子。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。

2、蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。

3、蓝斑。蓝白斑筛选是一种根据菌落颜色筛选重组子的方法,用于从细菌中筛选质粒,是通过在含有X-Gal-IPTG的LA培养基中,观察菌落颜色来筛选白色菌落中含有的重组子质粒,同时丢弃含有野生型质粒的蓝色菌落,所以挑选蓝斑。

4、二者相同。细菌的篮白斑筛选又称α互补法,是根据组织化学的原理来筛选重组体的方法。α互补可在指示平板上通过颜色筛选鉴别。

蓝白斑筛选(蓝白斑筛选的原理)
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5、蓝白斑筛选是一种基因常用的重组菌筛选方法。野生型大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。

蓝白斑筛选的蓝白斑筛选原理

1、蓝白斑筛选是一种基因工程常用的细菌重组子的筛选方法。野生型大肠杆菌(E.Coli)产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。

2、是重组子筛选的一种方法,一些载体带有β-半乳糖苷酶N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点,可用于构建重组子。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。

3、-溴-4-靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。在经人工插入外源基因后,突变型大肠杆菌的β半乳糖苷酶基因***入的外源基因切断,无法形成完整的β半乳糖苷酶,故不能对无色化合物X-gal进行切割,菌落呈白色。

4、蓝白斑筛选的机理 由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别,它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。

5、将目的基因插入LacZ靠近5‘端有多克隆位点,是否成功插入有待蓝白斑筛选鉴定。

蓝白班筛选中,蓝色菌落还是白色菌落最可能含有重组因子,为什么_百度知...

1、蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。

2、蓝斑。蓝白斑筛选是一种根据菌落颜色筛选重组子的方法,用于从细菌中筛选质粒,是通过在含有X-Gal-IPTG的LA培养基中,观察菌落颜色来筛选白色菌落中含有的重组子质粒,同时丢弃含有野生型质粒的蓝色菌落,所以挑选蓝斑。

3、这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补。而当外源dna插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。

4、蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为α-互补与抗生素基因。

5、添加IPTG。操作中,以激活lacz中的B-半乳糖苷酶的启动子,在含有X-gal的固体平板培养基中菌落呈现蓝色。以上是携带空载体的菌株产生的表型。

α-互补与蓝白斑筛选的关系

1、Lac Z′基因编码的α肽链与去了正常氨基端的β半乳糖苷酶突变体互补,这种现象称为α互补。

2、这种lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补。

3、这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。

4、蓝白斑筛选的原理 分类:生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。

5、的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为蓝白斑筛选。

6、根据蓝白斑筛选的定义,蓝斑表示无目的基因的空载体质粒成功转化大肠杆菌,其数量体现的是质粒穿透细胞膜的能力,白斑除了表示带有目的基因的重组载体的成功转化以外,还表示质粒根本就没进入大肠杆菌细胞。

比较蓝白斑筛选法与插入失活法筛选的优缺点

本实验利用抗生筛选转化子。 互补法:至今使用的许多载体(如PUC系列)有含有一个大肠杆菌DNA的短区段,其中含有β-半乳糖苷酸基因(lacZ)的调控序列和头146个氨基酸偏码区。这个偏码区中插入一个多克隆位点。

实验中,通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。

蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子。蓝白斑筛选主要为基因互补与抗生素基因。

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